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当前位置:南京信帆生物技术有限公司>产品中心>PCR引物合成服务 > 引物合成 > RT-PCR实验代测
点击次数：520 发布时间：2017/3/20 10:19:39
Real -Time PCR，即实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法，它是在PCR反应体系中加入荧光物质，并通过Real -Time PCR检测系统对PCR反应进程中的荧光信号强度进行实时监测，*终对实验数据进行分析处理的方法。Real -Time PCR自1996年由美国Applied Biosystems公司推出以来，广泛应用于生物研究的各个领域。目前主要有SYBR Green 染料、Taqman探针法两种。
RT-PCR实验代测
PCR实验代测，荧光定量PCR代测服主要仪器及耗材
旋涡振荡器 ：上海青浦泸西仪器厂产品
手握式电动匀浆机：德国FLUKO 公司产品
低温冷冻离心机：Sigma（3K15）公司产品
Real-time检测仪：ABI （ABI-7300）公司产品
超纯水分离系统：美国LABCONCO公司
离心管及10μL、200μL、1000μL枪头等常规耗材均为国产；RNA提取过程中所需的离心管、枪头等耗材经过0.1%的DEPC水浸泡过一夜，121℃灭菌30min，烘干后备用。
PCR实验代测，荧光定量PCR代测服实验室试剂的操作
1)所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。
2)所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压灭菌。
3)在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂，在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。
4)所用试剂都应该以大体积配制，实验一下看试剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。
5)所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。
6)新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。
7)样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。
RT-PCR实验代测
本程序适用于自动PCR操作，可适用于大多数情况，所用酶是不含核酸外切酶活性的热稳定聚合酶，如Taq聚合酶等。
引物（各50pmol） 0.2mmol/L dNTPs（必须使用高质量的dNTPs，这一点非常重要。dNTPs经反复化冻后会发生降解，因此应分成小份保存。应注意混合物中四种dNTP的量要相等） 模板DNA：约0.05～1mg基因组DNA或0.002～0.02mg质粒DNA Taq DNA聚合酶（Perkin Elmer, Norwalk, Connecticut） 10×PCR缓冲液（500mmol/L KCl，15mmol /L MgCl2，100mmol/L Tris·HCl，pH 8.3） 矿物油
电泳所需试剂
【仪器设备】
PCR扩增仪
电泳装置
微量离心机
微量移液器（1～20ml和20～200ml）
0.5ml Eppendorf 管
紫外线观察装置及照相设备
PCR代测,PCR技术服务,荧光定量PCR
信帆生物公司主要代理产品：
elisa试剂盒：进口elisa试剂盒,国产elisa试剂盒,人elisa试剂盒，大鼠ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒等。
培养基：微生物培养基,显色培养基,BD培养基,gibco培养基等。
血清：胎牛血清,人血清,动物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原装血清 。
生物试剂：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等进口试剂。
标准品对照品：进口对照品,进口对照药材,进口标准品.
抗体：一抗,二抗，流式抗体等。
放免试剂盒：进口放免试剂盒，国产放免试剂盒，进口美国凤凰等知名品牌放免试剂盒。
实验室代测服务：放免代测，WB实验，免疫组化代测，荧光定量PCR代测，病理细胞染色代测，生化实验代测等。
更新时间：2024/1/3 11:50:32
