酵母转化试剂盒这样操作才可以
产品说明：
酵母转化试剂盒主要用于酿酒酵母质粒转化实验，该试剂盒遵循广大用户的使用习惯，分别提供PEG、LiAc和Carrier DNA溶液，PEG、LiAc均经过滤除菌，Carrier DNA经特殊优化处理，更有助于提高质粒DNA的转化效率。该试剂盒可根据实际需要灵活配制1 × LiAc溶液和转化预混液，既方便使用，又经济实惠。
感受态细胞制备：
1.活化菌种。-80 ℃保存的菌种在YPDA培养基平板上划线，30 ℃培养2-4天。
2.挑取酵母单菌落在YPDA培养基平板上划3-5 mm的短线，30 ℃培养2-4天。
3.待酵母单菌落长至直径2 mm时，把酵母细胞接种到3 mL YPDA液体培养基中，30 ℃过夜培养。
4.第二天转接到含有30-50 mL YPDA液体培养基的三角瓶中继续培养，待OD600达到0.4-0.5，3000 rpm离心5 min，弃上清。
5.沉淀用30-50 mL的无菌的去离子水悬浮。3000 rpm离心5 min，弃上清。
6.沉淀用1.5 mL 1 × LiAc（150 μL 10 × LiAc Solution加1350 μL无菌水）重悬后转移至1.5 mL离心管中，3000 rpm离心5 min，弃上清。
注意：10 × LiAc Solution经过pH缓冲，无需添加TE作为缓冲剂。
7.加入1 mL 1 × LiAc重悬，小体积转化按照每管100 μL分装，用于文库转化不分装。
8.3000 rpm离心5 min，弃上清，感受态细胞即制备完毕。
注意：制备好的感受态立即使用，在第8步离心前，室温放置不应超过5小时。
注意事项：
1.转化全程需无菌操作。
2.初次使用Carrier DNA，请把装有Carrier DNA的管子在沸水中煮沸5 min，然后立即放在冰上，用后-20℃储存备用。下次使用前在冰上解冻Carrier DNA。反复冻融3-5次后需重新变性Carrier DNA。
3.PEG溶液在低温环境下会析出，请于常温环境下完全溶解后使用。
4. 根据质粒浓度增减体积，增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。
